Phire^® Animal Tissue Direct PCR Kit:
PCR suoraan eläinkudoksista ilman DNA:n eristystä

Phire® Animal Tissue Direct PCR -kitillä PCR on mahdollista suoraan erilaisista eläinkudoksista (esim. hiiri, kala, hyönteiset). DNA:n eristystä ei tarvita, minkä ansiosta kitti säästää merkittävästi aikaa ja kustannuksia. Phire Animal Tissue Direct PCR-kitti sopii kiinteille, fiksaamattomille eläinkudoksille, ja sillä on onnistuneesti monistettu DNA:ta myös suoraan viljellyistä soluista. Kitti sisältää reagenssit ja näytteenottotyökalut sekä direct- että dilution-protokollille. Direct-protokollalla saavutetaan kaikkein nopein lopputulos suoraan kudoksesta. Dilution-protokolla soveltuu erityisen hyvin PCR:ään, jossa samasta näytteestä monistetaan useita eri DNA-fragmentteja.

Kaksi vaihtoehtoista Direct PCR -protokollaa.

Direct-protokollassa pieni pala eläinkudosta laitetaan suoraan PCR-reaktioon. Dilution-protokollassa pieni pala eläinkudosta laitetaan Dilution-puskuriin ja inkuboidaan hetki. Tämän jälkeen 1 µl seosta lisätään PCR-reaktioon. Dilution-protokolla soveltuu erityisen hyvin, kun samasta näytteestä halutaan monistaa useita eri DNA-fragmentteja.

Phire^® Animal Tissue Direct PCR -kitin edut:

• Phire® Hot Start II DNA-polymeraasin erinomaiset ominaisuudet: sietää hyvin inhibiittoreita, 20s/kb ekstensioaika, ”zero-time”-lämpöaktivaatio, 2x Taq fideliteetti
• Kaksi yksinkertaista, vaihtoehtoista protokollaa
• Kitissä mukana helppokäyttöiset näytteenottotyökalut sekä universaalit kontrollialukkeet
• Ei DNA:n eristyksestä tulevia kustannuksia!

Phire^® Animal Tissue Direct PCR -kitti on testattu eri eläinkudoksilla

Phire Animal Tissue Direct PCR -kittiä on testattu useiden eläinlajien kudoksilla. Hyviä tuloksia on saatu tähän mennessä esimerkiksi hiirellä, karhulla, seeprakalalla, linnuilla, koiran/kissan/hevosen/lehmän karvoilla sekä Drosophilalla ja C.Elegansilla (kts viereinen kuva). Kitti soveltuu myös DNA:n monistamiseen suoraan viljellyistä soluista, kuten esimerkiksi hiiren fibroblasteista.

		Suora PCR eri eläinkudoksista 1: hiiren korva 2: karhun lihas 3: linnun sulka 4: naudan karva 5: hedelmäkärpäsen siipi 6: seeprakalan evä
		Transgeenisten hiirten genotyypitys. 11 yksittäiseltä hiireltä otettiin 0,5 mm näytepala korvakudoksesta. Näytteet siirrettiin suoraan 50 μl PCR-reaktioihin. Jokaisessa reaktiossa käytettiin kahta eri primeriparia. Suuremman fragmentin koko on 490 bp (transgeeninen) ja pienemmän 250 bp (villityyppi).

Kitin komponentit

Kit component F-130 Phire® Hot Start II DNA Polymerase 200 µl 2x Phire® Animal Tissue PCR Buffer (includes dNTPs and MgCl2) 5 x 1 ml Universal control primer mix 40 µl Dilution Buffer 5 ml DNARelease™ Additive 3 x 100 µl Gel loading dye 3 x 1 ml Harris Uni-Core™ 0.50 mm 1 Harris Cutting Mat™ 1

Lisätietoja

Phire Animal Tissue Direct PCR -kitin tuotesivu (englanniksi)
Direct PCR -pääsivu (englanniksi)

Tilaustiedot

Yhteyshenkilö

Marika Tallgren (o.s. Gardemeister)
puh: 09 2472 3251
faksi: 09 2472 3200
marika.gardemeister@thermofisher.com